少妇人妻精品,综合亚洲婷婷,美国av鲁鲁鲁在线,人妻熟妇精品无码久久久久

技術(shù)文章您的位置:網(wǎng)站首頁 >技術(shù)文章 > 從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的原則和注意事項
從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的原則和注意事項
更新時間:2020-12-11   點擊次數(shù):1346次
  從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的原則和注意事項
  瓊脂糖是從瓊脂中提取出來的,其中含有較多的酸根和羥基多糖。目前大多數(shù)級別的瓊脂糖中含有硫酸酯多糖,這種物質(zhì)能抑制基因克隆中使用的多種工具酶的活性,如DNA限制性內(nèi)切酶、連接酶等,在回收DNA時應(yīng)盡量減少這些物質(zhì)的污染。
  在分子生物學實驗中,我們通常需要分離純化特定分子量的DNA片段,用于接下來的實驗,比如酶切、連接的工作。下面主要介紹從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段的原則和注意事項,其主要原則有兩項:
  1、去除DNA樣品中的雜質(zhì):
  瓊脂糖是從瓊脂中提取出來的,其中含有較多的酸根和羥基多糖。目前大多數(shù)級別的瓊脂糖中含有硫酸酯多糖,這種物質(zhì)能抑制基因克隆中使用的多種工具酶的活性,如DNA限制性內(nèi)切酶、連接酶等,在回收DNA時應(yīng)盡量減少這些物質(zhì)的污染。不管用哪種方法進行回收DNA,都會用到2.5 mol/L醋酸銨和乙醇沉淀,再用70%乙醇漂洗數(shù)次,這樣處理,可以有效地去除一些有害的有機分子和無機鹽沉淀。近年來瓊脂糖的質(zhì)量大為提高,出現(xiàn)了如低熔點瓊脂糖這樣的產(chǎn)品,不但熔點降低,其中含有的對DNA工具酶有抑制作用的物質(zhì)也很少,所以有些低熔點的瓊脂糖可以直接在其溶液中對DNA進行內(nèi)切酶消化和DNA片段之間的連接反應(yīng)。
  2、提高DNA片段的回收率:
  DNA的回收率與DNA片段的大小有一定關(guān)系,分子量越大,回收率明顯下降,大于20kb時,回收率低于20%。這是由于大的DNA片段和DEAE纖維素紙的結(jié)合力強,很難洗脫下來。DNA片段的含量也和回收率有較為密切的關(guān)系,量越少回收率越低。
  回收DNA片段時應(yīng)注意以下事項:
  1、提高DNA上樣量;
  2、減小DNA回收時的洗脫容積,若容積過大,可先用正丁醇進行濃縮;
  3、正確選擇回收DNA片段的方法,根據(jù)回收片段的大小選擇適當?shù)幕厥辗椒ā?/div>
©2025  上海創(chuàng)凌生物科技有限公司 All Rights Reserved.  網(wǎng)站地圖  滬ICP備2023009255號-1  管理登陸  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)
在線客服 二維碼

掃一掃,關(guān)注我們

国产精品五月天久久久| 岛国精品一区二区不卡AV| 国产精品无码9999| 女鸡巴视频| 1区2区三精品| 99久久99久久精品片| 日本 欧美 国产 一区二区| 91九色人妻在线播放| 欧美自拍第二区| 91麻豆国产精品91久久| 看大鸡巴日水嫩 B| 日本精品99v| 肏人妻二区| 91fuliwang| 日韩和的一区二区区影院| 国产一区二区久久久久久久久久久久| 97人妻人人插人人澡| 日韩极品在线| 欧美AA久久久| 97国产成人| 电影91久久久| 一本道综合欧美一区| 国产ab四区| 亚洲hs精品在线| 神一区二区91| 精品国产成人无码永久免费网站| 日日日日x色| 国产欧美一区二区精品久久野外.| 在线观看国产日韩变态欧美| 少妇综合全新网| 成人五月天无码在线视频| xx一区二区| 九九精品电影网| 色综合色综合色综合色欲| AV五月天激情| 国产精品 偷| 午夜激情网站视频免费观看| WC精品一区| 久久久久一级二级| 狠狠躁日日躁欧美躁| 欧美剧情一区二区|